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स्किज़ोफिलम कम्यून के साथ बनना: पाए गए मशरूम से एक बाँझ संस्कृति बनाएं: 3 कदम (चित्रों के साथ)
स्किज़ोफिलम कम्यून के साथ बनना: पाए गए मशरूम से एक बाँझ संस्कृति बनाएं: 3 कदम (चित्रों के साथ)

वीडियो: स्किज़ोफिलम कम्यून के साथ बनना: पाए गए मशरूम से एक बाँझ संस्कृति बनाएं: 3 कदम (चित्रों के साथ)

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स्किज़ोफिलम कम्यून के साथ बनना: मिले मशरूम से एक बाँझ संस्कृति बनाएं
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यह निर्देश यह समझाने पर केंद्रित है कि मशरूम का उपयोग करके पेट्री डिश पर मशरूम स्किज़ोफिलम कम्यून (सामान्य नाम स्प्लिट गिल मशरूम) की एक बाँझ संस्कृति कैसे बनाई जाए। स्किज़ोफिलम कम्यून में 28, 000 से अधिक लिंग पाए गए हैं, अंटार्कटिका को छोड़कर सभी महाद्वीपों पर पाए जा सकते हैं, और अंतःस्रावी विघटनकारी प्रदूषण (प्लास्टिक, हार्मोन जैसे औद्योगिक पेट्रोकेमिकल्स की नकल करने वाले हार्मोन) को नीचा दिखाने की क्षमता (जैसे अन्य "सफेद और भूरे रंग की सड़ांध कवक") है। उर्वरक एट्राज़िन, प्लास्टिसाइज़र बिस्फेनॉल-ए, या सिंथेटिक हार्मोन डायथाइलस्टिलबेस्ट्रोल)।

मैं जंगली मशरूम की पहचान तकनीकों, पोषक तत्व अगर पेट्री डिश बनाने का तरीका, और अपने पेट्री डिश में एक बाँझ पृथक संस्कृति को विकसित करने के लिए अपने पाए गए मशरूम का उपयोग करने के तरीके के बारे में बताऊंगा। इस श्रृंखला के अन्य निर्देश मशरूम की आनुवंशिक पहचान, मशरूम की प्लास्टिक को तोड़ने की क्षमता और प्रदूषण की नकल करने वाले हार्मोन की क्षमता का परीक्षण करने के लिए सरल एंजाइमेटिक एसेज़ और एस.कॉम्यून के साथ पनीर बनाने के तरीके जैसी तकनीकों पर जाते हैं।

यह परियोजना मैरी मैगिक, पाउला पिन और मेरे द्वारा बार्सिलोना स्पेन में सितंबर 2018 में हैंगर में एक निवास के दौरान सहयोगात्मक कार्य से निकली। परियोजना के बारे में अधिक जानकारी के लिए ~~ पर पढ़ें या सभी ब्ला ब्ला को छोड़ें और सीधे चरण पर जाएं। 1 ट्यूटोरियल के लिए:)

छवियां स्किज़ोफिलम कम्यून फैनज़िन से हैं ~ फाइलें यहां मुफ्त में डाउनलोड की जा सकती हैं

रेजीडेंसी के दौरान हमारे तीन मुख्य लक्ष्य थे:

1 ~ स्किज़ोफिलम कम्यून पर वैज्ञानिक साहित्य का शोध और पाचन और यह हार्मोन और अंतःस्रावी पेट्रोकेमिकल प्रदूषकों को बाधित करने वाले विभिन्न अंतःक्रियाओं के साथ है। S. Commun कई "सफेद और भूरे रंग के सड़ांध" कवक में से एक है जिसमें हार्मोनल और अंतःस्रावी विघटनकारी प्रदूषण को तोड़ने की क्षमता है। ये कवक अपने नेटवर्क वाले शरीर या "माइसीलिया" से "लिग्नोसेल्यूलोसिक" एंजाइमों को बाहर निकालकर पेड़ों को खिलाते हैं और एंजाइम सेल्युलोज और लिग्निन को तोड़ने में सक्षम होते हैं जिससे पेड़ बनते हैं। सेल्युलोज, लिग्निन और ईडीएस/एट्राजीन, बीपीए, एस्ट्राडियोल, डायथाइलस्टिलबेस्ट्रोल और नोनीलफेनॉल्स जैसे हार्मोन के बीच संरचनात्मक समानता के कारण, कवक द्वारा स्रावित "लिग्नोसेल्यूलोसिक" एंजाइम भी विभिन्न प्रकार के विषाक्त पदार्थों को तोड़ सकते हैं। इसके अलावा, S. Commune इम्यूनोस्टिम्युलेटिंग पॉलीसेकेराइड का उत्पादन करता है जो कैंसर की रोकथाम और उपचार के रूप में सहायक होते हैं (सर्वाइकल कैंसर के उपचार के लिए जापान में स्वीकृत), किण्वन के माध्यम से कुछ पौधों के फाइटोएस्ट्रोजेनिक गुणों को बढ़ा सकते हैं, इसका उपयोग रेनेट और लैक्टोबैसिलियस के स्थान पर किया जा सकता है। पनीर बनाने की प्रक्रिया, और थ्रोम्बिन थक्का घुलने वाले एंजाइम (घनास्त्रता के उपचार में उपयोगी) का उत्पादन करते हैं। आश्चर्यजनक रूप से, ये वही "बीटा-ग्लूकेन्स" जिन्हें कैंसर के उपचार और इम्यूनोस्टिमुलेंट्स के रूप में उबलते पानी से निकाला जा सकता है, पेट्रोलियम उद्योग द्वारा तेल की पैदावार बढ़ाने के लिए भी उपयोग किया जाता है, एस. कम्यून को एक बिज़ार फीडबैक लूप में अंतःस्रावी विघटनकारी उत्पादन के लिए बांधता है। पेट्रोकेमिकल्स यह नीचा दिखाने और उपचार करने में सक्षम है।

2 ~ DIY और DIWO (दूसरों के साथ करें) प्रोटोकॉल विकसित करें जो कोडित वैज्ञानिक ज्ञान को अधिक सुलभ भाषा में अनुवाद करने के लिए EDC और कवक के साथ काम करने के लिए इन प्राप्तियों को सरल बनाते हैं। शिक्षा के लिए, पूछताछ के लिए, आणविक उपनिवेशों के प्रतिरोध के लिए, और बहु-प्रजातियों के बनने और हमारे सामूहिक उत्परिवर्तन के बारे में नए आख्यान बनाने के लिए इन व्यंजनों का उपयोग करें।

3 ~ अंतःस्रावी विघटनकारी रसायनों (ईडीसी) के आसपास के प्रमुख सिशेटेरोनोर्मेटिव, क्वीरफोबिक प्रवचन को चुनौती दें। मुद्दों पर मालिन अह-किंग और ईवा हेवर्ड की छात्रवृत्ति को उद्धृत करने के लिए, "कई समाचार आउटलेट हमारे पिछवाड़े से इन भयावह अंतःस्रावी कहानियों की रिपोर्ट कर रहे हैं। इन मुद्दों को अग्रभूमि करने के प्रयास में-जैसा कि हम निम्नलिखित में वर्णन करेंगे-मीडिया ने फ्रेंकस्टीन कायापलट किया है जो सेक्स और कामुकता के लिए खतरा है। विषाक्त जोखिम से जुड़े कई अन्य स्वास्थ्य जोखिमों को संबोधित करने के बजाय, सबसे सनसनीखेज और विवादास्पद मुद्दे बहस और आलोचनात्मक प्रतिक्रिया के लिए खड़े हैं। यह सवाल उठाता है: कैंसर से सेक्स अधिक केंद्रीय क्यों है, ऑटो-प्रतिरक्षा रोग, और यहां तक कि मौत भी? कौन सी सांस्कृतिक नसें (जिनमें से कई वैश्वीकृत हैं) ट्रिगर होती हैं? और, हम में से जो नारीवादी चिंताओं के साथ हैं, हम बहस को अनिवार्यता, लिंगवाद और विषमलैंगिकता से कैसे दूर करते हैं?" (विषाक्त लिंग)।

स्किज़ोफिलम कम्यून एक अद्वितीय "सफेद सड़ांध कवक" है जिसमें यह पाया गया है कि इसमें 28,000 से अधिक आनुवंशिक लिंग हैं। इस अनुकूलन, कई सिद्धांतों ने, इस प्रजाति की अविश्वसनीय आनुवंशिक विविधता को सक्षम किया है जो अंटार्कटिका को छोड़कर दुनिया भर के हर महाद्वीप पर मौजूद है। हम जीव विज्ञान की विचित्रता के एक उदाहरण के रूप में इस जीव की सुंदर यौन बहुलता का जश्न मनाना चाहते थे। मीडिया में ईडीसी के इर्द-गिर्द प्रमुख प्रवचन, और यहां तक कि पर्यावरण कार्यकर्ताओं से भी अवैज्ञानिक कथाओं पर बहुत अधिक ध्यान केंद्रित किया जाता है, कि ये अणु कुछ कामुकता या लिंग का कारण बनते हैं जिन्हें हमारा समाज विकृत करता है, गैर-मानक लेबल करता है, और अक्सर इसे खत्म करने या टालने का प्रयास करता है। ईडीसी के वैज्ञानिक रूप से अवास्तविक (हार्मोन और अंतःस्रावी व्यवधान लोगों को क्वीर या ट्रांस नहीं बनाते हैं) के बारे में सार्वजनिक आक्रोश का न केवल सेक्स-घबराहट, क्वीर फ़ोबिक फ़ोकस है, बल्कि यह उन सभी विनाशकारी वास्तविक प्रभावों की अनदेखी कर रहा है जिन्हें हम ईडीसी से जोड़ सकते हैं: मोटापा, थायराइड विकार, कुछ कैंसर, अन्य स्वास्थ्य जोखिमों के बीच।

चरण 1: अपने समुदाय में रहने वाले स्किज़ोफिलम कम्यून का पता लगाएं

अपने समुदाय में रहने वाले स्किज़ोफिलम कम्यून का पता लगाएं
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अपने समुदाय में रहने वाले स्किज़ोफिलम कम्यून का पता लगाएं

स्किज़ोफिलम कम्यून की लैब ग्रेड बाँझ संस्कृतियों को एटीसीसी जैसे माइक्रोबायोलॉजिकल कल्चर बैंक से लगभग $ 350 में खरीदा जा सकता है … यही कारण है कि हमने जंगली मशरूम से मुफ्त में संस्कृति का विकल्प चुना:)

मेरे लिए यह आसान था क्योंकि मैं स्किज़ोफिलम कम्यून के बारे में पढ़ रहा था और मैंने देखा कि यह एक दिन मेरे अपार्टमेंट के सामने एक पेड़ पर उग रहा है। यदि आप अपने पड़ोस में एस कम्यून पर गलती से ठोकर खाने के लिए इतने भाग्यशाली नहीं हैं, तो आप बीमार दृढ़ लकड़ी के पेड़ों पर उगने वाले "ब्रैकेट" मशरूम की खोज के लिए जंगली इलाके में जाना चाहेंगे (ऐसे पेड़ जो दिखते हैं जैसे वे नहीं कर रहे हैं बहुत अच्छी तरह से) या गिरे हुए पेड़। S. Commune दुनिया भर में सबसे आम मौजूदा कवक में से एक है और मूल रूप से कहीं भी पाया जा सकता है जहां बढ़ने के लिए दृढ़ लकड़ी है।

Mushroomobserver.org इस बात का विस्तृत विवरण प्रदान करता है कि आपको S. Commun कहाँ और कब मिलने की संभावना है, साथ ही इसकी पहचान कैसे करें और "समान दिखने वाले" से कैसे बचें जिससे गलत पहचान हो सकती है:

"पहचान: स्किज़ोफिलम कम्यून को इसके विभाजित गलफड़ों, घने बालों और पंखे के आकार की टोपी द्वारा आसानी से पहचाना जाता है। टोपी 1-4.5 सेमी चौड़ी होती है और आमतौर पर एक खोल या पंखे के आकार की एक ग्रे से सफेद सतह के साथ होती है। बेसिडियोस्पोर 5-7.5 × 2 होते हैं। -3 माइक्रोमीटर। एक समान मशरूम जिसे "क्रिम्प्ड गिल" के रूप में जाना जाता है, प्लिकैट्यूरोप्सिस क्रिस्पा उतना व्यापक रूप से वितरित नहीं है।

पर्यावास: स्किज़ोफिलम कम्यून लिग्निन को नीचा दिखाने के लिए एंजाइमों का उपयोग करके दृढ़ लकड़ी पर बढ़ता है और "सफेद सड़ांध" का कारण बनता है। तो यह ज्यादातर किसी भी जंगली क्षेत्रों में पाया जाता है। यह सूखने की क्षमता, बेहतर परिस्थितियों में पुनर्जलीकरण, और फिर स्पोरुलेट करना जारी रखने की क्षमता के कारण वर्ष भर पाया जा सकता है।

यह कवक छोटे व्यास के पेड़ों पर परजीवी हो सकता है जो सूखे जैसे अन्य कारकों से तनाव में हैं।

लुक अलाइक: प्लिकैट्यूरोप्सिस क्रिस्पा या "क्रिम्प्ड गिल" स्प्लिट गिल के समान है। इसमें एक खोल/पंखे के आकार का फलने वाला शरीर भी होता है। हालांकि टोपी एक लाल भूरे या पीले भूरे रंग की है, और नीचे की तरफ बहुत विशिष्ट है। इसमें गलफड़ों की तरह सिकुड़ी हुई नसें होती हैं जो स्किज़ोफिलम कम्यून के विभाजित गलफड़ों से बहुत अलग होती हैं। क्रिम्प्ड गिल कम आम है लेकिन पाए जाने पर विशिष्ट है।"

चरण 2: S. Comune पर बढ़ने के लिए पोषक तत्व अगर प्लेट्स बनाएं

एस कम्यून की संस्कृति को अलग करने के लिए आपने पाया है कि आपको मशरूम के लिए भोजन से भरे कुछ पेट्री डिश की आवश्यकता होगी। एस. कम्यून, या "पोषक तत्व मीडिया" के लिए माल्ट एक्सट्रेक्ट एगर एक सरल भोजन है जिसे आसानी से सुलभ सामग्री के साथ बनाया जा सकता है। यह एस.कॉम्यून और अन्य सफेद या भूरे रंग के सड़ांध कवक के साथ एंजाइमेटिक परख प्रयोग करते समय उपयोग करने के लिए एक अच्छा खाद्य स्रोत है ~~ इस प्रक्रिया को एक अन्य निर्देश में शामिल किया जाएगा।

साइड नोट: यदि आपको एस. कम्यून को खोजने में परेशानी होती है, तो एक ही परिवार में कई अन्य कवक हैं जिन्हें समान प्रक्रियाओं का उपयोग करके सुसंस्कृत किया जा सकता है और अंतःस्रावी विघटनकारी प्रदूषकों को कम करने में बेहतर नहीं तो उतना ही अच्छा है। टर्की टेल (ट्रैमेट्स वर्सीकोलर) कई अध्ययनों में पाया गया है कि सैकड़ों सफेद और भूरे रंग के सड़ांध कवक को "लिग्नोसेल्यूलोसिक" एंजाइम के उच्चतम उत्पादक के रूप में देखा गया है जो पेट्रोकेमिकल प्रदूषण को कम करते हैं। ऑयस्टर मशरूम भी इसमें बहुत अच्छे होते हैं।

मैं अपना माइक्रोबायोलॉजिकल काम BUGSS (बाल्टीमोर अंडरग्राउंड साइंस स्पेस) नामक एक सामुदायिक जीव विज्ञान प्रयोगशाला में करता हूं, जहां मेरे पास कांच के बने पदार्थ, डिजिटल स्केल, स्नातक किए गए सिलेंडर, एक आटोक्लेव (मीडिया की गर्मी और दबाव नसबंदी के लिए) आदि की पहुंच है। इस तरह की प्रयोगशालाएं हैं पिछले एक दशक में दुनिया भर में उभरा है, इसलिए आप यह देखने के लिए इस सूची की जांच कर सकते हैं कि आपके पास कोई है या नहीं। यदि आपके क्षेत्र में इस तरह की एक महान सामुदायिक प्रयोगशाला नहीं है, तो आपको इस प्रक्रिया के लिए कुछ बुनियादी उपकरणों में निवेश करना होगा जैसे:

1 ~ आपकी सामग्री को सटीक रूप से मापने के लिए एक डिजिटल पैमाना

2 ~ आपके मीडिया को गर्मी और भाप से स्टरलाइज़ करने के लिए एक प्रेशर कुकर

3 ~ पेट्री डिश, बहुत सस्ते में ऑनलाइन खरीदा जा सकता है, पुन: प्रयोज्य ग्लास या डिस्पोजेबल प्लास्टिक काम करेगा लेकिन पुन: उपयोग करने योग्य हमेशा बेहतर होता है:)

4 ~ आपकी सामग्री को मिलाने, स्टरलाइज़ करने और स्टोर करने के लिए कुछ कांच के बने पदार्थ।

यदि आप उस उपकरण में निवेश नहीं करना चाहते हैं, तो आप अमेज़ॅन जैसी वेबसाइटों पर खरीदने के लिए पहले से डाले गए माल्ट एक्सट्रैक्ट अगर प्लेट्स पा सकते हैं ~ यदि आप माइक्रोबायोलॉजिकल काम करना जारी रखने की योजना बनाते हैं तो यह लंबे समय में और अधिक महंगा होगा।

घर पर अपना खुद का पोषक मीडिया पेट्री डिश बनाने के तरीके के बारे में पहले से ही कई बेहतरीन गाइड और यूट्यूब वीडियो हैं। इसलिए इस पर विस्तार से जाने के बजाय, मैं सिर्फ एक जोड़े से लिंक करूंगा - और 2% माल्ट एक्सट्रेक्ट एगर के लिए नुस्खा प्रदान करूंगा, जो कि पोषक माध्यम है जिसका आप उपयोग करेंगे।

फ्रेशकैप मशरूम: घर पर मशरूम उगाने के लिए अग्र प्लेट्स बनाने के तरीके पर गाइड

Mykoweb: मशरूम की खेती के साथ शुरुआत करना

माल्ट एक्सट्रैक्ट अगर तकनीकी डाटा शीट

2% माल्ट अर्क अगर (MEA) ~~ 1 लीटर के लिए पकाने की विधि:

20 ग्राम माल्ट एक्सट्रैक्ट (बीयर बनाने की आम आपूर्ति, ऑनलाइन खरीदी जा सकती है)

15 ग्राम आगर (सॉलिडिफाइंग एजेंट - इसका उपयोग अक्सर पकाने के लिए किया जाता है, इसलिए इसे ऑनलाइन या कुछ किराने की दुकानों पर खरीदा जा सकता है)

1 लीटर H20 (मैं आमतौर पर रिवर्स ऑस्मोसिस पानी का उपयोग करता हूं जिसे गैलन जग में अधिकांश किराने की दुकानों पर खरीदा जा सकता है)

यदि आप कम मात्रा में बनाना चाहते हैं तो यह नुस्खा आसानी से संशोधित किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, मैं अक्सर एक बार में केवल 250 एमएल बनाता हूं, इसलिए मैं केवल 5 ग्राम माल्ट एक्सट्रैक्ट, 3.75 ग्राम अगर और 250 एमएल पानी का उपयोग करता हूं।

चरण 3: अपने पेट्री डिश को कवक से सजाएं

कवक के साथ अपने पेट्री डिश को शुद्ध करें!
कवक के साथ अपने पेट्री डिश को शुद्ध करें!
कवक के साथ अपने पेट्री डिश को शुद्ध करें!
कवक के साथ अपने पेट्री डिश को शुद्ध करें!
कवक के साथ अपने पेट्री डिश को शुद्ध करें!
कवक के साथ अपने पेट्री डिश को शुद्ध करें!
कवक के साथ अपने पेट्री डिश को शुद्ध करें!
कवक के साथ अपने पेट्री डिश को शुद्ध करें!

आप जो मशरूम देखते हैं उसे "फलने वाला शरीर" कहा जाता है यह जीव का केवल एक छोटा सा हिस्सा है। इसके शरीर का अधिकांश भाग पेड़ (या जमीन में) में छिपा होता है, लकड़ी का सेवन करता है। मशरूम के इस भाग को माइसेलियम कहते हैं। एक पेट्री डिश पर शिज़ोफिलम कम्यून के सफेद फिलामेंटस, टेंटैकुलर, राइजोमैटिक, मायसेलियल बॉडी को कल्चर करने के लिए, आप स्टेम का एक नमूना लेंगे, स्टरलाइज़ करेंगे और अपनी MEA प्लेट्स पर रखेंगे। मायसेलियम निष्फल मशरूम स्टेम कोर नमूने से विकसित होगा और सफेद सूती चटाई की तरह दिखने वाले पेट्री डिश को उपनिवेशित करेगा।

आपको ज़रूरत होगी:

  • पिछले चरण में आपके द्वारा तैयार की गई माल्ट एक्सट्रेक्ट एगर (MEA) प्लेट
  • 70% आइसोप्रोपिल अल्कोहल (रबिंग अल्कोहल) और एक स्प्रे बोतल
  • कागजी तौलिए
  • स्केलपेल, या सिर्फ एक स्टेनलेस स्टील रेजर - बॉक्स कटर काम करेगा
  • धातु चिमटी
  • दस्ताने
  • एक लौ - मैं उपकरणों की नसबंदी के लिए एक अल्कोहल लैंप का उपयोग करता हूं, नॉनडिसजंक्शन के पास यहां एक बनाने के लिए एक महान ट्यूटोरियल है।
  • काटने के लिए बाँझ सतह (मैंने अभी इसके लिए एक बाँझ पेट्री डिश का इस्तेमाल किया है)
  • पैराफिल्म, एक पैराफिन फिल्म है जिसका उपयोग पेट्री डिश को सील करने के लिए किया जाता है - यदि आपके पास यह नहीं है तो आप केवल मास्किंग टेप का भी उपयोग कर सकते हैं

बाँझ तकनीक:

स्टेराइल तकनीक का उपयोग करते समय आपको जो मुख्य बात ध्यान में रखनी चाहिए वह यह है कि बैक्टीरिया और बीजाणु लगातार हवा में गिर रहे हैं, इसलिए आप अपने पेट्री डिश को जितना हो सके ढक कर रखना चाहते हैं। जब आप मीडिया डालने के लिए ढक्कन उठाते हैं, या टीका लगाते हैं, तो हमेशा डिश के ऊपर ढक्कन को पकड़ना सबसे अच्छा होता है, जिससे आप अंदर क्षैतिज रूप से पहुंच सकते हैं, लेकिन बैक्टीरिया को गिरने से रोकने के लिए ढक्कन को डिश के ऊपर रखते हैं। दूसरे, आप मानव, जीवाणु, कवक, और अन्य जीवों का एक विशाल समूह है ~~ हालांकि आप इसे देख नहीं सकते हैं, आप सूक्ष्म जीवों के घने बादल से घिरे हैं जो आपके शरीर से फैल रहे हैं। आपकी त्वचा की सतह पर बैठने के बजाय, आपका माइक्रो-बायोम हवा में फैल जाता है ~~ sooooooo, पेट्री डिश पर अपने हाथ कभी न हिलाएं, या देखने के लिए खुली डिश पर झुकें नहीं। और दस्ताने पहनें यदि वे आपके पास है;)

अपना अर्ध-बाँझ कार्य स्थान सेट करें

मलबे और कबाड़ से मुक्त एक गैर-छिद्रपूर्ण कार्य सतह चुनें। अपने 70% इसोप्रोपाइल अल्कोहल समाधान के साथ क्षेत्र को स्प्रे करें और इसे एक कागज़ के तौलिये से पोंछ लें। अपनी लौ को अपने कार्य क्षेत्र के केंद्र में रखें और इसे जलाएं। आप जितना संभव हो सके लौ के करीब काम करना चाहेंगे क्योंकि यह इसके चारों ओर एक छोटा बाँझ क्षेत्र बनाता है। अपनी विदेश मंत्रालय की प्लेटों को एक तरफ रखें और अपने मशरूम के नमूने को दूसरी तरफ एक बाँझ काटने की सतह पर रखें। मैं आमतौर पर एक बाँझ पेट्री डिश का उपयोग अपनी बाँझ काटने की सतह के साथ-साथ एक उपकरण आराम के रूप में करता हूं। एक छोटे गिलास में कुछ आइसोप्रोपिल अल्कोहल डालें - आप इसका उपयोग काम करते समय अपने ब्लेड और चिमटी को कीटाणुरहित करने के लिए करेंगे।

*¡~ टीका ~!*

कुछ भी करने से पहले, अपने ब्लेड और चिमटी को आइसोप्रोपिल एल्क में डुबो कर और फिर उन्हें आंच पर थोड़ी देर के लिए पकड़कर जीवाणुरहित करें। नसबंदी के बाद, यदि आप उन्हें नीचे सेट करते हैं, तो उन्हें अपनी बाँझ काटने की सतह पर रख दें। चिमटी का उपयोग करके, मशरूम के तने को स्थिर रखें और इसके सिरे से एक टुकड़ा काट लें। इस टुकड़े को लें और सभी पक्षों को काट लें ताकि आप मशरूम स्टेम कोर के एक छोटे से क्यूब के साथ सभी बाहरी सतहों को हटा दें। यह मशरूम पर रहने वाले अन्य सभी रोगाणुओं से छुटकारा पाने में मदद करता है ताकि वे आपकी संस्कृति को दूषित न करें। फिर स्टेम कोर को लगभग ३० सेकंड के लिए आइसोप्रोपिल में डुबोएं, बाहर निकालें, और लौ के बाँझ क्षेत्र में सूखने दें (इसे सुखाने के लिए लौ का उपयोग न करें, इससे मशरूम मर जाएगा)। जब आप स्टेम कोर के सूखने की प्रतीक्षा करते हैं, तो लौ फिर से चिमटी को जीवाणुरहित कर दें। फिर बस अपनी एक MEA प्लेट का ढक्कन उठाएं ताकि चिमटी को किनारे से अंदर की ओर स्लाइड किया जा सके, और प्लेट के केंद्र में स्टेम कोर को रखने के लिए निष्फल चिमटी का उपयोग करें। पैराफिल्म के साथ प्लेट को सील करें, और अगले कुछ हफ्तों में, आपको एस. कम्यून मायसेलियम प्लेट को उपनिवेशित करते हुए देखना चाहिए।

जंगली नमूनों के साथ काम करते समय मैं आमतौर पर कई प्लेट बनाता हूं ताकि अगर मैं दूषित हो जाऊं, तो मेरे पास कम से कम एक स्वच्छ संस्कृति होने की अधिक संभावना है।

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